菌落计数与面积测量的高效化

在食品或化妆品、医药品等评价安全性的微生物检查或遗传毒性试验等中，如何高效地进行培养板的整体观察或菌落的准确分析及定量评价，是一个重要课题。另外，在再生医疗研究领域，针对使用iPS细胞（诱导性多功能干细胞：induced pluripotent stem cell）的新治疗法或治疗药的实用化，广泛开展各种实验或研究。作为其中一项研究项目，评价孔板中正在培养的iPS细胞的菌落形成的数量或形态分析时，也存在相同的课题。
下面，介绍通过搭载大型电动载物平台实现孔板全孔观察的荧光显微镜ℱ以及对培养板上的iPS细胞进行菌落计数与🅘面积测量的案例。

welcome购彩大厅用户注册 :菌落数值与占地侧量
化解菌落运算与总面积测定的范例

菌落计数与面积测量

为确保产品安全性而实施的微生物检查或遗传毒性试验。在微生物检查中，对培养基上活菌菌落数量的经时变化进行计数，以计算菌数量的形式并进行微生物评价。另外，在作为一种遗传毒性试验的Ames试验（艾姆斯试验）中，向原本无法自己产生氨基酸的菌株投入试验物质，根据其中形成的菌落及其比重来评价诱发突变性。
在此类实验中，需要对随着时间变化而🐬在培养板上增殖，变化的活细胞或菌落进行区分测量，如果凭借测量人员的目视测量计数，容易产生数值的偏差或人为误差，影响对该培养板的准确评价。以高倍率观察培养板或计数并评价♛形成的菌落时，由于视野变窄无法快速观察培养板整体的情况，需要花费大量时间逐一视野查看计数。而且还有很大的风险漏看错看。

另外，在再生医疗研究领域，观察培养板整体并准确分析iPS细胞菌落数量是评价该实验的重要方法。并且，在以改善培养工序以及提高培养效率为目的的实验中，需要大量进行针对不同条件、培养基种类以及传代方法等对比试验。
但是，在菌落计数或测量中，因各工作人员手动计数的标准以及方法不🎐同造成的结果的偏差和人为误差，会影响统计结果的准确性。尤其是iPS细胞在培养过程中形成菌落的同时细胞也在自我增殖，菌落内的细胞形态会发生变化。因此，细胞间的界限可能难以判断，更增大了目视计数的难度进而影响评价ﷺ的准确性。

在發生了一键数值差错或自动式数值时發生了误检时，需要开支大规模日期和经费预算直接重置科学试验操作。在各种各样的审核或测式、科学试验操作等中，在编制数有现的情形下清除劳神与日期上的无意间浪费，并获得比较多成就，需要也加强大数据确切性与工作上的效率。

解决菌落计数与面积测量的案例

基恩士的一体化荧光显微成像系统BZ-X800，仅需1台即可以多功能支持荧光、相位差、明视场观察及各种拍摄方法。还可实现培养板的整体观察、定量菌落计数及面积测量等，解决实验、研究或试验、检查中的诸多课题。
结合使用电动载物台的全自动图像拼接模块来观察培养板整体，以及对iPS细♐胞培养板的整体图像进行菌落分析的案例，介绍导入BZ-X800的优点。

使用大型电动载物台进行的培养板整体观察

应用电子显微镜在高倍数下关注菌落时，由视线变宽，就必须边同步保存载物台方位角顺次联通视线关注局部位形象。如此，始终无法将致力于板产品上定为一种视线内的还以高倍数关注肺部结节影菌落。也可将高倍数制作的形象路经形象治理接拼成1张形象，以赢得大视线形象，但确认清理实际操作通过接拼安全作业不止难度大，还需用非常多精力。上面所论，如何高速在经时改变的活癌细胞或活菌不诞生影响力的情況下，高速关注致力于板产品上十分注重。

BZ-X800搭载大型电动载物台，可按照程序在X、Y、Z轴方向上自动移动的同时，在高倍率下连续拍摄图像，并自动进行图像拼接，可轻松获取培养板整体的高分辨率图像。即可观察培养板整体的大视野图像，也可观察高倍率下菌落的形态，在不遗漏且不会遗失观察坐标的情况下进行观察。
另外，可对多孔培养板中的多个孔自动执行批量图像拼接。

培养板整体中iPS细胞菌落计数与面积测量的高效化案例

活细胞或活菌的经时变化影响到对培养板内的分析结果与评价，因此重要的是快速获得定量分析结果。
以下图像是对使用BZ-X8ඣ00的图像拼接🏅获得的iPS细胞培养板单孔图像，使用“混合细胞计数”自动实施菌落计数及面积测量的案例。通过大视野观察对培养板整体中菌落的数量及面积的平均、标准偏差、总数值进行定量测量，可快速获得分析结果。由此，得以消除手动计数所需的大量时间与劳力，以及发生人为误差的风险。

个数

251个

平均面积

8315 µm²

面积标准偏差

12652 µm²

面积总计

2086967 µm²

使用物镜：CFI60 CFI Plan Apo λ 10x
图像拼接：7张 × 9张

使用多孔培养板时，通过使用BZ-X800的“宏细胞计数”，可以以其中1张图像的分析条件作为模板，在同一条件下批量自动测量其他的多张图像。
采用人工计数对多个孔的菌落进行分析，不仅花费大量的时间与精力，还因不同的测量人员因操作方法不一而发💝生分析结果及评价上的偏差，BZ-X800则可在短时间内轻松实现定量测量与评价。

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